Burbuja Seca Causada por Verticillium
David M. Beyer, Paul J. Wuest, Jacquelyn J. Kremser
Translated by Carla Garzon
Este documento informativo ha sido diseñado
para servir como una revisión constructiva de la Burbuja Seca causada por Verticillium,
la enfermedad de origen fúngico más común de la seta comercial Agaricus
bisporus. Un mejor
entendimiento de la biología del hongo que causa la burbuja seca puede ayudar a
los fungicultores a controlar esta enfermedad.
Para algunos de ellos esta enfermedad
no es más que una pesadilla recurrente.
Debido a la dificultad para obtener nuevos o mantener anteriores
pesticidas registrados, parece que la batalla contra esta enfermedad continuará
por muchos años. El objetivo de
esta hoja de datos es informar a los fungicultores sobre la biología básica de
esta enfermedad y proporcionar además alguna información práctica.
Síntomas
Se ha
descrito una variedad de síntomas para esta enfermedad. La diversidad en la
manifestación de síntomas se debe al momento en que ocurre la infección con
relación a los diferentes estadíos de desarrollo del cultivo y a la cantidad
de esporas que causan la infección inicial.
El estadío en el desarrollo del cultivo en el que ocurre la infección,
la cantidad de esporas que inician la infección y el tiempo que transcurre
desde el arribo de una espora hasta la aparición de síntomas, son factores que
parecen influenciar el tipo de síntoma que podemos encontrar.
Por tanto, reconocer todos los síntomas ayudará a determinar cuándo
ocurrió la infección inicial y esa información puede ser usada para controlar
la enfermedad. Se han escrito
varias publicaciones que describen la relación entre esporas y el desarrollo de
enfermedad (Sinden, 1971; Gandy, 1973; North and Wuest, 1993).
Burbuja
El síntoma
más conspicuo encontrado ha sido descrito como una masa de tejido fúngico en
forma de globo, una burbuja seca (Figura 1).
Una seta sola o un racimo de setas puede convertirse en
una masa esférica de tejido que cubre toda el área infectada.
Ocasionalmente, conforme el tejido enfermo envejece, pueden aparecer unas
pocas gotas de líquido color ámbar. A
menudo estas gotas causan confusión con otra enfermedad fúngica, burbuja húmeda,
causada por Mycogene sp.(Figura 2).
Sin embargo, la diferencia está en que en la burbuja seca solo unas
pocas setas infectadas muestran las gotas color ámbar, y en aquellas que lo
hacen las gotas son muy pequeñas. La burbuja húmeda
se caracteriza por presentar gotas de color ámbar grandes y numerosas que
cubren la masa de tejido fúngico. La
burbuja como síntoma usualmente indica una infección severa y temprana del botón
fúngico o incluso anterior a que el botón sea visible.
La infección temprana altera el crecimiento del tejido fúngico evitando
que se desarrolle hacia formas diferenciales del pedicelo (estipe) y la
sombrilla (pileo).
Figura 1. Seta infectada con Verticillium, exhibiendo el síntoma de la masa de tejido o burbuja seca.
Figura
2. Hongos infectados con Mycogene
sp. manifestando los síntomas de burbuja húmeda.
Estipe
partido
Cuando
la infección ocurre después que el botón empieza a desarrollarse y el estipe
esta infectado, éste se divide conforme va madurando, causando un síntoma
descrito como estipe partido o tallo reventado, Figura 3. La infección evita el
crecimiento del tallo en un lado del hongo, mientras que el extremo sano continúa
creciendo normalmente. El extremo
infectado del tejido se divide o rompe causando este síntoma característico.
Figura
3.
Seta infectada con burbuja seca causada por Verticillium
exhibiendo el síntoma de tallo reventado.
Puntos
necróticos
Este síntoma
ha sido descrito como grandes manchas de color café, con un tono gris difuso en
el centro, Figura 4. Estos puntos
tienen normalmente un diámetro entre 0.7 y 1.8 cm.
El área gris que cubre estos puntos es tejido del patógeno esporulando
y el área café oscura ayuda a distinguirlo de la mancha bacteriana, que tiene
un color más claro y amarillento. Este
síntoma usualmente se desarrolla cuando la infección ocurre más tarde en el
desarrollo del hongo, cuando los botones son más grandes o cuando una pequeña
infección puntual ocurre en la cabeza de una seta.
Figura
4. Seta infectada con burbuja seca causada por Verticillium
exhibiendo puntos necróticos.
Moteado
Otro síntoma
es la aparición de puntos cafés del tamaño de la cabeza de un alfiler en la
sombrilla de la seta. Este síntoma
es a menudo confundido con la formación de puntos a causa de otros patógenos,
tal como Trichoderma o a veces también
con hoyos bacterianos, Figura 5. Lo
mas probable es que este síntoma aparezca cuando la concentración de esporas
es pequeña y la infección ocurre tarde en el proceso de formación de botones.
Figura
5. Seta infectada con burbuja seca causada por Verticillium
exhibiendo moteado.
Ausencia
de síntomas
Algunos
investigadores han reportado que las setas pueden carecer de síntomas en la
cama de cultivo antes y al momento de la cosecha, y la aparición de puntos
ocurre más tarde. Es posible que
estas setas no sean aptos para la venta al momento en que llegan a los mercados,
pero lo más importante es que pueden diseminar esporas por toda la granja.
Los cosechadores pueden tocar las setas infectadas sin darse cuenta y
transportar esporas hacia áreas no infestadas.
El
Organismo Causal
Patógeno
(organismo que causa la enfermedad): Verticillium
fungicola (Preuss) Hassebrauk var. fungicola
Este
hongo causa la enfermedad conocida como burbuja seca en la seta comercial Agaricus
bisporus. Verticillium
es además un patógeno de muchas setas silvestres. Por tanto, es comúnmente encontrado alrededor de granjas
durante temporadas de clima cálido, cuando otras setas silvestres y mohos
crecen, Figura 6. El método más fácil
para identificar a este patógeno es cultivarlo en un medio selectivo.
El medio selectivo ha sido desarrollado para permitir a Verticillium que crezca más rápido que cualquier competidor.
Los detalles de cómo preparar este medio de cultivo estan en la
publicación de Rinker et al., 1993. Cuando Verticillium
es cultivado en PDA (potato-dextrose agar), a temperatura ambiental, las
colonias son blancas y el color del fondo de las placas es entre incoloro y
amarillento. Algunos cultivos
pueden tener un perfil bajo con bordes redondeados y formando curvas.
Si uno puede medir las esporas debajo de un microscopio, estas deben
medir 8-10 um de largo por 1-3 um de ancho y estrechándose hasta 0.5-1.0 um en
la punta. Desde el punto de vista
de diseminación y control de enfermedades, el carácter morfológico más
importante es que las esporas son producidas en una matriz gelatinosa. Este
material gelatinoso recoge y mantiene
muchas esporas juntas. Este mismo
material es el que pega las esporas a moscas, personas y equipo. Esta gelatinosa masa de esporas es atraída fácilmente por
partículas de agua, lo que hace cualquier cosa que esté relacionado con agua
sea especialmente susceptible a diseminar esporas por la granja.
Figura
6. Vista microscópica del patógeno fúngico Verticillium
fungicola.
El hongo
produce una tremenda cantidad de esporas microscópicas,
las cuales son invisibles a simple vista.
Se ha estimado conservadoramente que una seta infectada puede producir 30
millones de esporas en una hora. También
se ha reportado que toma tan solo 4 500 esporas por libra en caja para causar
una perdida parcial y 45 millones de esporas por libra en caja para no cosechar
ninguna seta. Las esporas y el
micelio del hongo puede permanecer en condiciones secas por hasta seis meses y
puede sobrevivir durante los meses de invierno en el interior de las
instalaciones o debajo de desperdicios por toda la granja.
Controlar la diseminación de la enfermedad es como luchar contra un
enemigo invisible.
Desarrollo
de la enfermedad
Infestación
temprana
La
primera infestación con esporas de Verticillium
puede ocurrir tan temprano como al momento de poner la composta en cajas, pero
no antes. Generalmente las esporas que aterrizan en la composta cuando ya esta
colonizada por micelio no causan enfermedad.
Se ha sugerido que incluso esporas que están en la composta antes de
empacarla no causan enfermedad. Sin
embargo, recientemente se ha comprobado que esporas aplicadas en grandes
cantidades en la composta antes de que sea empacada pueden inducir el desarrollo
de la enfermedad (Beyer y Kremser, no publicado).
Una vez
que el encajonado es aplicado y los rizomorfos empiezan a desarrollarse,
aparentemente las esporas de Verticillium
se vuelven disponibles y agresivas alrededor del los nuevos brotes.
Las esporas ubicadas en la caja y en los brotes dentro de ella germinan y
la enfermedad se desarrolla.
Dispersión secundaria a través de vectores
Las
esporas que causan burbuja seca se pueden dispersar dentro de una casa de
producción o de cultivo a cultivo. El
método más fácil y común de dispersión es a través de agua. Ha sido demostrado que 60 gotas de agua sobre un mismo sitio
salpican esporas a una distancia de dos pies (Cross y Jacobs, 1969).
Por tanto, regar con agua setas ubicadas en el borde de una repisa
salpicará esporas a la persona que las está regando.
Sin saberlo, esta persona puede diseminar las esporas a lo largo de la
cama de cultivo y a los otros cultivos que riegue ese día.
Las
esporas son a menudo arrastradas en partículas de polvo y gotitas de agua en el
aire. No se necesitan grandes gotas
de agua para arrastras esporas. Una
fina neblina, apenas perceptible, seria suficiente para moverlas.
Las partículas de polvo funcionan como vectores casi de la misma manera,
dado que las esporas se pegan a ellas, y si se levantan del suelo pueden
aterrizar sobre las cajas e infectar los botones.
El vapor de agua puede transportar esporas rápidamente alrededor de un
cuarto o granja. El lavado de los
pisos, aunque es una práctica higiénica recomendada, puede salpicar esporas
del piso a las camas o bandejas. Se
sabe de epidemias causadas por el lavado excesivo de los suelos en las casas de
producción. Los cuartos y granjas
se ven inmaculados porque los cultivadores invierten muchas horas lavando los
pisos con mangueras o sistemas de lavado a presión.
Desafortunadamente durante la limpieza, salpicadura desde los pisos
arrastran esporas hasta las camas, creando serios problemas.
Esto no sugiere que los cuartos deban ser mantenidos sucios, pero sí que
la limpieza debe hacerse con un sistema de agua a baja presión o sin agua en
absoluto. Una paleta limpia
ventanas es la mejor herramienta para limpiar desperdicios en un cuarto porque
las escobas levantan polvo y partículas que arrastran esporas.
Moscas
sirven como portadoras de la enfermedad y al controlar sus poblaciones se puede
reducir la ocurrencia de Verticillium.
Algunas veces la enfermedad puede desarrollarse más rápidamente con una
infestación de nematodos. Esto no
sugiere que los nemátodos dispersan burbuja seca, pero ácaros araña roja, a
menudo encontrados en presencia de grandes poblaciones de nemátodos, recogen
esporas y las mueven alrededor de la cama de cultivo o del cuarto.
Otros ácaros que se alimentan de mohos en la composta pueden ser un
problema. Eliminar la fuente de
alimento para estos arácnidos tiene muchas ventajas.
El hongo tendrá más alimento disponible, menos competencia, y los
transportadores de esporas serán eliminados.
Los cultivadores pueden también dispersar la enfermedad. Cada vez que entran a una casa con burbuja seca, muchas
esporas son recogidas y pueden ser transportadas a un cultivo nuevo.
Por tanto, los cultivadores deben ser concientes de su movimiento
alrededor de la granja, para minimizar el transporte de esporas.
Los trabajadores que monitorean la temperatura y aquellos que cubren las
setas infectadas con sal o alcohol son también potenciales portadores de la
enfermedad. North
y Wuest (1993) han enfatizado la importancia de las setas “libres de síntomas”
en el desarrollo de esta enfermedad. No
solo las setas que muestran síntomas obvios pueden ser las potenciales fuentes
de esporas; también pueden serlo algunas setas que no desarrollan síntomas
sino hasta después de la cosecha. Estas
setas “libres de síntomas” pueden acarrear esporas que pueden ser
dispersadas por cultivadores, cosechadores y otro personal.
Burbuja
seca puede ser también un problema en climas más fríos cuando la granja es
invadida por ratones. Los roedores
viajan entre los cuartos escarvando en las camas para alimentarse de los retoños.
Ellos corren por el suelo recogiendo esporas y a menudo van de los
cultivos viejos a los nuevos.
Humedad relativa, temperatura y otros factores ambientales
Los factores ambientales en los cuartos van a afectar
la tasa de desarrollo de la enfermedad. El
hongo Verticillium gusta de
condiciones abrigadas y húmedas para su crecimiento y reproducción.
Es posible que la humedad y la temperatura elevadas sean las responsables
del acelerado desarrollo y dispersión del hongo durante
el verano. Siempre se ha
pensado que desde el momento en que una espora germina hasta que los síntomas
se desarrollan en las setas transcurren alrededor de 14 días.
Las cepas híbridas son generalmente cultivadas a temperaturas
ligeramente mayores y se pone más énfasis en mantener una más alta humedad
relativa para mejorar la su calidad. Por
tanto, el tiempo de desarrollo de la enfermedad es mucho más corto, talvez 7-10
días. En un ambiente más
favorable, el ciclo vital de Verticillium
es más rápido lo que significa que habrá más esporas producidas en un tiempo
más corto. Por tanto, dependiendo
de la cantidad de enfermedad, podemos considerar un ligero compromiso del
ambiente en el cuarto para el desarrollo de Verticillium.
Se ha reportado que la manipulación de las condiciones ambientales en
que se mantiene un cultivo puede reducir el desarrollo de la enfermedad.
Una reducción en la temperatura del aire de 20°C (68°F) a 14°C (57°F)
y de la humedad relativa de 90 a 80% por varios días reduce el porcentaje de
setas infectadas (Nair y Macauley, 1986). Una
reducción de estos parámetros puede frenar la germinación y el crecimiento
del patógeno, y tiene menos influencia en el crecimiento de las setas.
Sin embargo, en la práctica solo se puede conseguir esta manipulación
del ambiente si el tiempo hasta la cosecha no se ve afectado negativamente.
Es importante además tener control de estos cambios para asegurarse que
otras enfermedades, como la mancha bacteriana, no se conviertan en problemas.
Monitoreo de la enfermedad
El
primer paso en el control de la enfermedad es una evaluación del cultivo para
determinar cuándo aparece la primera burbuja. La planificación del calendario
de aplicación de funguicidas y la localización de la fuente inicial de infección
pueden ser conseguidas solo con la determinación exacta de cuándo son vistos
los primeros síntomas. Los
cosechadores deben ser entrenados para reconocer cómo se ven las setas enfermas
y deben alertar al fungicultor cuando las primeras setas sintomáticas sean
observadas. Algunas granjas hacen
que los cosechadores coloquen un palo o sorbete cerca de la burbuja, siendo
extremadamente cuidadosos de no tocar las setas enfermas o las setas alrededor
de éstas. Usando este sistema de
marcación, el fingicultor sabrá cuándo aparece la enfermedad y entonces las
personas encargadas de salteado o del control de la enfermedad podrán encontrar
las setas enfermas para aplicar el tratamiento.
Desafortunadamente,
esta enfermedad puede escalar a una epidemia y entonces tomará semanas para que
la carga de esporas reduzca gradualmente en la granja y se pueda recuperar el
control sobre la enfermedad. Esta
reducción en la carga de esporas alrededor de la granja y en las casas de
producción es un componente importante del control. Cómo reducir esta carga de esporas es el problema.
Primero, el o los vectores que están dispersando las esporas deben ser
identificados y eliminados. Desde
el momento del desarrollo del primer síntoma, el fungicultor debe revisar quien
o que estuvo en contacto con el cultivo alrededor de
10 a 14 días antes; a
temperaturas más cálidas y con mayor humedad
en los cuartos de cultivo, ese tiempo debe ser reducido a alrededor de 7
a 10 días. A menudo, burbujas
secas identificadas antes del primer brote indican que el cultivo fue infestado
por algo distinto al personal de cosecha o su equipo.
El
cultivo puede ser protegido con cualquier fungicida disponible u otras técnicas.
No es necesario usar funguicidas hasta después del encajonamiento.
Los fungicidas disponibles en los Estados Unidos son Benlate (Benomyl),
Bravo (Chlorothalonil) y Mertect (Thiabendazole).
Bravo puede ser usado en estados donde éste tiene un registro temporal
en la sección 18 de la EPA. Cada año
es más difícil renovar este registro temporal en cada estado.
La posibilidad de registrar el complejo Prochloraz-manganesio (Sporgon) o
Mancozeb (Dithane M-45) parece sombría e, incluso en el caso de que sea posible,
completar el registro de éste y cualquier nuevo funguicida podría tomar años,
a un alto costo. Cuando se usan
fungicidas, se recomienda rotar o alternar su aplicación.
La rotación de funguicidas puede ayudar a reducir el incremento
progresivo de resistencia de Verticillium
a un solo producto. El calendario
de aplicación de fungicidas es crítico y por tanto es otra razón importante
para determinar exactamente cuando se observan los primeros síntomas. Es importante asegurarse de que el fungicida cubra
completamente el cultivo a la concentración apropiada.
Estos productos son costosos y por tanto el fumigador debe asegurarse de
alcanzar el centro de las camas así como las esquinas posteriores, y alrededor
de los bultos. Cuando se usa un
desinfectante o baños de cloruro para sumergir las boquillas de las mangueras o
las herramientas, es igualmente importante el mantener la concentración
efectiva del químico. Suciedad y
materia orgánica en el tanque reduce la concentración efectiva del ingrediente
activo. Cualquier movimiento de
agua o personal de los cuartos antiguos a los nuevos, incluso durante pausas de
descanso o para pedir instrucción a un supervisor, debe ser suspendido.
Varias
prácticas de cultivo pueden afectar el desarrollo de la enfermedad.
Se ha sugerido que un mayor crecimiento de brotes en la superficie de las
cajas al momento de recolectar botones está relacionado con un incremento en la
incidencia de la enfermedad. Este
fenómeno no sugiere que el fungicultor debe descartar el cultivo antes de lo
acostumbrado para controlar la enfermedad, pues esto resultaría en un excesivo
número de setas sucias. Sin
embargo, evitar el excesivo crecimiento de los brotes sobre la superficie puede
ayudar a reducir la enfermedad. Además,
cepas que son más fáciles de recolectar pueden mostrarse menos sensibles que
cepas que son más difíciles de recolectar, porque más crecimiento vegetativo
ocurre sobre la superficie del cultivo que cuando se usa cepas “difíciles de
recolectar”.
No se
puede insistir lo suficiente, mantenga la granja limpia. Esto no solo inculca un buena mentalidad en los empleados, ésto
ademas elimina sustratos para el crecimiento de Verticillium. Durante
clima cálido y húmedo, la materia orgánica y desechos de setas proveen un
excelente hábitat para que Verticillium
crezca y produzca esporas rápidamente. Por
tanto, las esporas no solo son producidas en cultivos infectados, sino que
esporas adicionales son generadas alrededor de toda la granja.
Figura
7. Pila de sal cubriendo una
burbuja seca causada pro Verticillium.
Muchas
granjas tienen una o más personas designadas para buscar setas infectadas y
cubrirlas con sal (Figura 7) o rociarlas con alcohol. Esta técnica es más efectiva en los primeros brotes de la
enfermedad. No se debe tocar o
remover la burbuja infectada. Severos
brotes de infección son difíciles de cubrir y normalmente es muy tarde para un
control efectivo. Dado que la carga
de esporas es tan alta en esos cuartos, el tráfico adicional alrededor de esos
cultivos puede diseminar aún más la enfermedad.
Desafortunadamente cubrir setas que muestran síntomas no previene la
dispersión de esporas a partir de setas “libres de síntomas” u otras
fuentes de infección. El salteo o
la eliminación de las burbujas debe hacerse diariamente y debe tener 4 a 6
pulgadas en diámetro, cubriendo completamente o rodeando la burbuja.
Sal de mesa o en roca, HTH pulverizado al 15% o alcohol al 80% pueden ser
usados para cubrir o rociar las áreas infectadas.
La
boquillas de riego, el equipo de cosecha, moscas, ácaros, roedores, personal de
riego y sembradores son los medios de transporte obvios para las esporas que
diseminan la enfermedad. Todas las
piezas de equipo que entran en contacto con el cultivo después del
encajonamiento deben ser limpiadas a profundidad y desinfectadas.
Si es posible, para los cultivos nuevos o en cada cuarto, se debe usar
una boquilla diferente. Sumerja las boquillas en un baño desinfectante entre cuarto
y cuarto si tienen que ser compartidas.
Otros
procedimientos importantes incluyen el asegurarse de que el piso del cuarto
alcance 60 °C (140°F) por varias horas durante el pico de temperatura.
A menudo la composta alcanza 60 °C (140°F) antes que el piso o el área
más fría del cuarto alcancen esa temperatura el suficiente tiempo para
asegurar la eliminación de esporas sobrevivientes.
Después de la colonización y en encajonamiento, lo pisos deben ser
limpiados para remover todos los pedazos de composta y encajonamiento con un
fuerte desinfectante o con una solución de cloruro.
Es importante que el desinfectante no llegue a la superficie de la
composta o de las cajas.
Todas
las herramientas y otro equipo que sea llevado a la casa de cultivo en cualquier
momento desde la colonización del
substrato hasta su desinfección mediante vapor debe ser desinfectada
profundamente. Todas las canastas
de cosecha deben ser desinfectadas al vapor o sumergidas en desinfectante después
de cada uso y antes de regresar a los cuartos para continuar la cosecha.
Las esporas de Verticillium y otras enfermedades pueden ser ser fácilmente
acarreadas de regreso a las casas de cultivo en estas canastas.
Ningún químico debe ser usado en estas canastas, a menos que sean
enjuagadas completamente, para asegurarse de que ningún residuo químico quede
en las setas.
Manejo
integrado de plagas (IPM)
El
mejoramiento de otros problemas de cultivo en la granja ayudará a reducir la
dispersión de las esporas. Si la
preparación de la composta y la Fase II son adecuados, se reducirá mohos y nemátodos,
que sirven de alimento a los ácaros. Mantener la población de moscas bajo control es una parte crítica
del control. A veces, “mordemos
la bala” y desinfectamos al vapor los cultivos que están fuertemente
infectados, antes de una segunda recolección de botones.
Este “dolor a corto plazo para una ganancia a largo plazo” es solo
efectivo si todos los otros aspectos de un programa de control evitan que las
esporas reinfecten los nuevos cultivos.
Hasta la
fecha, todos los productos de control biológico introducidos en la industria
han fallado en controlar adecuadamente esta enfermedad.
La dificultad del uso de agentes biológicos para esta enfermedad se
puede deber a la incapacidad del agente de control biológico de establecerse
firmemente en el cultivo antes de que Verticillium esté presente. A
menudo, los agentes de control biológico requieren de una cierta cantidad del
patógeno para estar activos, de manera que el organismo de control pueda
sobrevivir.
Los
resultados preliminares de algunas investigaciones reciente han demostrado que
el uso del substrato para setas gastado (SMS, del inglés spent mushroom
substrate) y procesado como material para encajonamiento suprime el desarrollo
de la enfermedad. El procedimiento
para preparar el material de encajonamiento no se ha desarrollado comercialmente
y el nivel de supresión de la enfermedad no justificó económicamente el uso
de este proceso. Mayor investigación
se esta realizando para identificar mecanismos de supresión que puedan estar
activos en el SMS. Sin
embargo,algunos productos de control biológico son útiles en el control de
moscas, las cuales son vectores comunes de la enfermedad.
Estos productos serán discutidos en futuras publicaciones informativas.
El
objetivo científico es aprender más sobre el hongo patógeno. Necesitamos saber más sobre los requerimientos nutricionales
y ambientales de Verticillium y sobre
el desarrollo de esta enfermedad. Sabemos
que la manipulación de las condiciones ambientales tiene un efecto en el
progreso de la enfermedad, pero también que resulta difícil hacer esto y
mantener el ciclo del cultivo y la calidad de las setas.
Hay otras prácticas que incentiven o que reduzcan el crecimiento de Verticillium?
Hay agentes de control biológico o compuestos que podamos usar en contra
de él? El estudio de esta
enfermedad se debe convertir en una prioridad para el éxito continuado del
cultivo de setas.
Bonifacino,
S.F. 1980. A Compendium of Major
Sporocarpic Diseases of the Commercial Mushroom Agaricus
bisporus (Lange) Imbach. M.A.
Dept. of Plant Pathology, The Pennsylvania State University. 86 p.
Cross,
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Gandy, D. 1973. Observations on the development of Verticillium malthousei in mushroom crops and the role of cultural practices in its control. Mushroom Sci. 8:171-182.